Определение биологической активности антисыворотки

Оно основывается на ее иммунохимичееком поведении. Еще при исследованиях, которые осуществил Кохен (1960) считалось, что тормозящее действие антисыворотки на активность нервного роста объяс­няется наличием осаждающих антител. Из специфического преципитата уда­лось отделить активность NGF путем обработки разведенными щелочами. Приготовленный нами лично препарат давал с гомологичной иммунной сыво­роткой кролика положительную кольцевидную реакцию до разведения 1 : 12300.

При тестировании при помощи иммунодиффузии и иммуноэлектрофореза, антиген специфический для препаратов NGF высокой очистки со сниженным молекулярным весом (30000, 28000 или 14000) давал единственную полосу осаждения для соответствующего антигена. Антисыворотка специфическая для препарата Варона (с 140000 РМ) давала несколько таких полосок, что говорит о недостаточности ее специфичности. Заслуживает внимания то об­стоятельство, что различия поведения вызвали целый ряд противоречий, связанных с химической природой фактора роста. Например Варон и сотр. (1967 а, б, 1968, 1970) связывают появление многочисленных полосок иммуно­осаждения, полученных препаратом с РМ 140000 и со специфической анти­сывороткой, с существованием комплексной структуры фактора, состоящей из 3 вышеописанных подъединиц, из которых одна является активной, а другие неактивными, с регулирующей ролью. Данные, которые получили Анджелетти, Боккини, Займис и др. как при помощи цитированных методов, так и путем реакции связывания микро­комплемента, приводят серьезные аргументы против этого предположения. Наличие единственной полосы иммунной преципитации там, где антисыво­ротка в отношении фактора Варона дает несколько полосок, говорит как за специфичность приготовленной антисыворотки этими авторами, так и за су­ществование мономера-носителя активности NGF, степень полимеризации которого обуславливает видимую гетерогенность фактора.

Добавить комментарий